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ELISA實(shí)驗(yàn)常見(jiàn)問(wèn)題的綜合解答
更新時(shí)間:2025-09-01瀏覽:202次

  ELISA實(shí)驗(yàn)?常見(jiàn)問(wèn)題的綜合解答

  以下是關(guān)于本生?ELISA實(shí)驗(yàn)?常見(jiàn)問(wèn)題的綜合解答,結(jié)合多個(gè)高可信度來(lái)源整理:

  一、樣本處理與適用性?

  非標(biāo)準(zhǔn)樣本類(lèi)型?:

  若樣本類(lèi)型未在試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)注,建議先進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證適配性,或直接聯(lián)系廠家獲取技術(shù)文獻(xiàn)支持?。

  溶血影響?:

  輕微溶血可通過(guò)?增加洗板次數(shù)?(如5次以上)降低背景值;嚴(yán)重溶血需重新取樣?。

  凍融影響?:

  反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致蛋白降解,建議分裝保存(如每管100μL),避免多次凍融?。

  二、樣本類(lèi)型選擇?

  樣本類(lèi)型? ?適用場(chǎng)景? ?注意事項(xiàng)?

  血清? 免疫檢測(cè)、生化分析 缺乏凝血因子,避免纖維蛋白干擾?

  血漿? 凝血因子檢測(cè)、蛋白定量 需添加抗凝劑(如EDTA、肝素)?

  三、實(shí)驗(yàn)操作關(guān)鍵點(diǎn)?

  包被與封閉?:

  抗體/抗原需用包被緩沖液(pH 9.0–9.6)稀釋?zhuān)?7℃孵育2小時(shí)或4℃過(guò)夜?。

  封閉步驟不可省略?,推薦使用牛血清白蛋白(BSA)或脫脂奶粉?。

  洗滌與顯色?:

  洗滌需(3–5次),避免殘留物干擾?。

  顯色階段需避光,TMB底物反應(yīng)時(shí)間控制在10–30分鐘?。

  常見(jiàn)問(wèn)題排查?:

  假陽(yáng)性?:可能由試劑污染或洗板不充分引起?。

  白板/顯色淡?:檢查抗體活性、孵育時(shí)間或底物失效?。

  四、標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)與結(jié)果計(jì)算?

  標(biāo)準(zhǔn)品需覆蓋預(yù)期樣本濃度范圍,相關(guān)系數(shù)(R2)應(yīng)≥0.99?。

  終止液加入后15分鐘內(nèi)完成讀數(shù),避免信號(hào)衰減?。

  如需進(jìn)一步了解具體操作細(xì)節(jié),可觀看以下視頻教程:

  以上內(nèi)容綜合了樣本處理、實(shí)驗(yàn)操作及異常結(jié)果解析,確保實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性。


試劑盒常見(jiàn)問(wèn)題及解決方案.png


  注:以上資料僅供參考,不作為實(shí)驗(yàn)依據(jù),具體產(chǎn)品資料請(qǐng)咨詢(xún)技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。

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