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本生教您如何選擇細胞培養板?
更新時間:2022-08-08瀏覽:1841次

  本生教您如何選擇細胞培養板?

  細胞培養板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型);培養孔的孔數有6、12、24、48、96、384、1536 孔等;根據材質的不同有Terasaki板和普通細胞培養板。具體選擇時根據培養細胞的類型、所需培養體積及不同的實驗目的而定。

  (一)平底和圓底(U型和V型)培養板的區別和選擇:

  貼壁細胞一般用平底培養板。懸浮型細胞的培養一般用V型。

  U型培養板亦多用于培養懸浮型細胞 。V型培養板有時用做免疫學血凝集的實驗。

  不同型狀的板子自然有不同用途。平底的什麼類型的細胞都可用﹐但當細胞數目較少﹐如做克隆時﹐就用96孔平底板﹐另外﹐做MTT等實驗時﹐無論貼壁和懸浮細胞﹐一般均用平底板。至於U或V型板﹐一般在某些特殊要求時才使用。如在免疫學方面﹐當做兩種不同淋巴細胞混合培養時﹐需要二者相互接觸以刺激﹐因此﹐一般需要U型板﹐因細胞會由於重力的作用而聚集在一個很小的範圍內。V型板的用途更少﹐一般用于細胞殺傷實驗時﹐為了使效靶細胞緊密接觸﹐常使用V型板﹐但這種試驗也可用U型板替代(加入細胞後﹐低速離心)如果是養細胞的話, 通常是選用平底的, 另外要特別注意材質, 標示"Tissue Culture (TC) Treated"就是養細胞用的。

  圓底的好像沒聽說過拿來養細胞。 圓底的通常是拿來做分析, 化學反應, 或是保存樣品用的, 因為圓底比較好將液體吸得乾淨, 如果用平底的就不好吸了。 不過, 如果你是要測吸光值的話, 一定要買平底的才行。

  大部分細胞培養都用平底培養板,便于鏡下觀測、有明確的底面積、細胞培養液面高度相對一致,還便于MTT檢測。

  圓底培養板主要用于同位素摻入的實驗,需要用細胞收集儀收集細胞的培養,如“混合淋巴細胞培養"等。  區別:酶標板一般要比細胞培養板貴,細胞板主要做細胞培養,但也可以用來測蛋白濃度;酶標板包括包被板和反應板,一般不能用做細胞培養,它主要做免疫酶聯反應后的蛋白檢測,它需要更高的要求還需要特定的酶標工作液。如下是個用酶標板檢測冠狀病毒IgM/IgG抗體例子:見網站

  常用不同培養板的孔底面積及推薦加液量:不同孔板所加培養液的液面都不宜太深,一般在2-3mm范圍,結合不同孔的底面積就可算出各培養孔的適宜加液量。若加液量過多會影響氣體(氧氣)交換,而且在搬動過程中易溢出造成污染。具體所加細胞密度依實驗的目的不同靈活掌握。

  培養器皿 面積(cm2)培養液量(ml) 細胞量

  96 孔培養板 0.32 0.1 10e5

  24孔培養板 2 1.0 5×10e5

  12孔培養板 4.5 2.0 10e6

  6孔培養板 9.6 2.5 2.5×10e6

  3.5 cm 培養皿 8 3.0 2×10e6

  6 cm 培養皿 21 5.0 5.2×10e6

  10 cm 培養皿 55 10.0 13.7×10e6

  25cm2 培養瓶 25 5.0 5×10e6

  75cm2 培養瓶 75 15~30 2×10e7

  (一)細胞培養板的密閉和污染問題:

  細胞培養板的加樣和操作:細胞培養板在進行細胞操作時同樣遵循嚴格無菌的原則,各項操作要保證規范、科學,不對細胞的生長造成額外的影響。這其中最常見的問題就是如何保證加樣后細胞的均勻和盡量減少換液對細胞生長狀態的影響。

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